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人单核细胞来源的树突状细胞微观流变学研究
王国涛1，唐军民1*，唐岩1，战军1，曾柱2**，文宗耀2*
（北京大学基础医学院1组织学与胚胎学教研室，2流变学与细胞信息学研究中心，北京 100191）
[摘要] 目的探讨……，为……提供新的理论依据和技术方法。方法应用……，获得……。并应用……对……进行鉴定；在此基础上，在国内外首次应用微观流变学……进行了测量和分析。结果改进后的……纯度；所获……具有典型形态结构及表型；……较大变化；……。结论人单核细胞……，其微观流变学特性发生了明显变化……。
[关键词] 树突状细胞、……、……、……、……
WANG Guotao1, TANG Junmin1*, TANG Yan1, ZHAN Jun1
ZENG Zhu2**, WEN Zhongyao2*
（1Department of Histology and Embryology, 2Center of the Biorheology and Cell Information, Healthy Science Center, Peking University, Beijing 100191 ,China）
[Abstract] Objective The aim of the present study was to find ……. Methods PBMCs were selected by the density isolation, and the highly purifiedmonocytes as …….., …… FACs, light microscope and electronic microscope…….methods.Results The highly purified……by our improved method ……..，and the pDC were induced ……. Fluorescence polarization measurement indicated …… and increased elasticity and deformability. The results of FT-IR show ……. Conclusion There are some notable microrheological changes in the …….
[Key Words] Dndritic cells, Membrane fluidity, Cell electrophoretic mobility, Osmotic fragility, Membrane viscoelastic properties, FT-IR
树突状细胞（dendritic cell，DC）是由……。目前，……。
由于在免疫过程中的作用以及重要的临床应用价值，DC成为国内外研究热点, 但对……，特别是对DC微观流变学特性的研究……。本研究将从……测定它们的微观流变学指标，并对这些指标进行了比较分析。
1.材料与方法
新鲜正常人外周血由……提供。所有献血者在采血前均被告知实验内容，同意后进行初检，采血后进行复检，均未发现异常。
1.1主要试剂及仪器
RPMI-1640培养液（美国GIBCO……）；淋巴细胞分离液（密度ρ(g/ml)=1.077±0.002，……）；……。
1.2不同发育阶段树突状细胞的获得及纯化
取正常人新鲜（3h内）抗凝外周血，离心300×g、15min；取白细胞层，……，
1.3 树突状细胞的鉴定及纯度测定
对获得的pDC、imDC、mDC用如下方法进行鉴定：…….
........
1.6细胞膜流动性的测量
Hitachi 850型荧光分光光度计分别测定……
1.6.1 收集各类细胞：……
1.6.2 根据公式⑴计算荧光偏振度p：
⑴
其中，IVV为起偏器和检偏器光轴均在垂直方向时的荧光强度；IVH为……
1.6.3 ……
1.7细胞的傅立叶红外光谱（FT-IR）测定
……
1.8 数据处理
得到的实验结果以均值±标准差（）的形式表示，用t检验对不同数据之间做统计学分析，以p<0.05为具有显著性差异，以p>0.01为无统计学意义。
2．结果
2.1 树突状细胞的形态和表面标志
……
图1 不同发育阶段DC的扫描电镜像：A、pDC（单核细胞）；B、……
用免疫细胞化学（SP法）显示……结果见表2：
表2 不同发育阶段DC的免疫细胞化学结果
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单核细胞
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imDC
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mDC
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CD1a
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CD14
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…….
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阳性（+）为黄色；强阳性（++）为棕黄色；……
2.2细胞纯度：
流式细胞仪检测结果见图2：……
2.3 电泳率
结果见表3：……
表3 不同发育阶段DC的电泳率
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